中文名稱:熱休克蛋白(HSP)抑制劑(HSP70-IN-1) 英文名稱:HSP70-IN-1 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg 產(chǎn)品貨號:BJ-01X8349 HSP70-IN-1是一種熱休克蛋白(HSP)抑制劑;抑制Kasumi-1細胞的生長的IC50值為2.3μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! :1268273-90-0 純度:98.05% 分子量:464.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1) 準備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。 小鼠 CD8B 基因全長ORF克隆大鼠血小板因子3(PF-3)免疫試劑盒進口、分裝 小鼠 WNT-4 基因全長ORF克隆大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應 小鼠 MAP2K4 基因全長ORF克隆大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒*直銷 小鼠 SEMA4D 基因全長ORF克隆大鼠血小板衍生生長因子B(PDGF-B)免疫試劑盒進口、組裝 小鼠 SDC1 基因全長ORF克隆大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒進口、分裝 小鼠 DLL4 基因全長ORF克隆大鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應 小鼠 CD200R4 基因全長ORF克隆大鼠血小板衍生生長因子A(PDGF-A)免疫試劑盒*直銷 小鼠 FUT4 基因全長ORF克隆大鼠血小板生成素(TPO)免疫試劑盒進口、組裝 小鼠 ADIPOQ 基因全長ORF克隆大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)免疫試劑盒進口、分裝 小鼠 SEMA3C 基因全長ORF克隆大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應 小鼠 WNT6 基因全長ORF克隆大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫試劑盒*直銷 熱休克蛋白(HSP)抑制劑(HSP70-IN-1)葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 Glucose Tryptone Agar 250g 100g 牛膽粉 OX Bile Powder 室溫保存 50T 沙眼衣原體和淋球菌PCR聯(lián)合測定試劑盒 低溫運輸,-20℃保存 10g N-2- -N’-3- 丙磺酸 HEPPS 室溫避光保存 250mL Carbonate Buffer(鹽緩沖液),0.5M,pH9.4 Carbonate Buffer,0.5M,pH9.4 常溫保存 50mL 剝離硅烷 Repeling Silane 常溫 2 ug pGro7 pGro7 低溫運輸,-20℃保存 RV肉湯(EP) Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth 250g 1瓶 HOS細胞株 HOS 低溫運輸和保存 菌種保存和標本運送培養(yǎng)基 500U β-瓊脂糖Ⅰ 操作規(guī)程 1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時. 2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。 3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。 4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。 7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。 8、結(jié)果分析 a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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