中文名稱:RSK抑制劑(LJI308) 英文名稱:LJI308 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg 產(chǎn)品貨號(hào):BJ-01X7913 LJI308是新型有效的RSK抑制劑,抑制RSK1,RSK2,和RSK3IC50值分別為6nM,4nM,和13nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! :1627709-94-7 純度:99.40% 分子量:368.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1) 準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。 二. 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。 人 HIST1H2AJ 基因全長ORF克隆小鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 人 CBY1 基因全長ORF克隆小鼠髓樣細(xì)胞觸發(fā)性受體2(TREM2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人 GNRH2 基因全長ORF克隆小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒*直銷 人 G0S2 基因全長ORF克隆小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 人 SCGB2A1 基因全長ORF克隆小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 人 HOXA10 基因全長ORF克隆小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人 HMGN4 基因全長ORF克隆小鼠酸性(ACP)免疫試劑盒*直銷 人 SCGB1D1 基因全長ORF克隆小鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝 人 DEFB119 基因全長ORF克隆小鼠酸性β葡萄糖苷(GBA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝 人 PRAC 基因全長ORF克隆小鼠絲裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng) 人 TOB1 基因全長ORF克隆小鼠絲轉(zhuǎn)肽抑制劑Kazal type 3(SPINK3)免疫試劑盒*直銷 RSK抑制劑(LJI308)原肌球蛋白受體激酶抑制劑(TRK抑制劑)(LOXO-101) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg LOXO-10110uL AP標(biāo)記的抗抗體 Anti Biotin Ab,AP 4℃保存 MNK1和MNK2抑制劑(eFT508) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg eFT5082 ug pK18mobSacB pK18mobSacB 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 PORCN抑制劑(ETC-159) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg ETC-159解磷細(xì)菌培養(yǎng)基(有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基) Phosphate-solubilizing bacteria medium 250g ALK4/ALK5抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg EW-71971瓶 M5076細(xì)胞株 M5076 低溫運(yùn)輸和保存 HGFR和VEGFR抑制劑(Foretinib) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Foretinib接觸皿培養(yǎng)基 contacts medium 250g Akt廣譜抑制劑(Afuresertib) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Afuresertib1瓶 HCT-116細(xì)胞株 HCT-116 低溫運(yùn)輸和保存 高活性ALK5抑制劑(SB525334) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg SB 525334100mL TB Solution-IV TB Solution-IV 常溫保存 Akt1/Akt2/Akt3活性抑制劑 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg AKT inhibitor VIII2次 包涵體大量純化試劑盒 Inclusion Body Maxiprep Kit 常溫保存(需要-20℃保存) Akt活化抑制劑(Honokiol) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg Honokiol2 ug pSUOER-retro-puro pSUOER-retro-puro 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 BMI-1抑制劑(PTC-209) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg PTC-209100mL 水飽和 Water-Saturated Phenol 常溫避光保存 BMPI型受體激酶抑制劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg LDN193189 Hydrochloride2 ug pCMV-Tag 5B pCMV-Tag 5B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 操作規(guī)程 1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí). 2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。 3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。 4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。 7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。 8、結(jié)果分析 a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
|